作者：赵焕英; 赵春礼; 鲁玲玲; 鲁强; 刘延英; ...多巴胺d2受体帕金森病基因治疗原位杂交人
摘要：目的构建人全长D2R基因真核表达载体,研究D2R在帕金森病(PD)中的作用和机制.方法将D,R cDN段克隆于pLNCX2逆转录病毒载体,转染成纤维包装细胞系PT67,G418筛选单克隆后进行传代培养,通过原位杂交、免疫组织化学和Western blot检测其表达效果.病毒上清再感染骨髓基质细胞(MSCs),免疫荧光检测D2R基因表达率.结果成功构建了逆转录病毒表达载体pLNCX2-D2R,原位杂交证实D2R基因在PT-67表达的阳性率为80%以上,免疫组织化学检测可见其蛋白分布在胞浆和胞膜,细胞裂解后Western blot蛋白电泳可检测到约48.84kD的蛋白.经转染D2R基因的PT67细胞能分泌病毒并感染MSCs.结论逆转录病毒介导的D2R基因经PT67细胞包装后,能够产生病毒颗粒,收集含病毒颗粒的上清可进一步感染MSCs,这种经逆转录病毒介导的D2R基因可用来作针对帕金森病进行基因治疗的研究.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
