作者：王莉; 常彦忠; 段相林细胞凋亡浓度变化钙离子转运激光共聚焦扫描显微镜离子对细胞内钙离子浓度流式细胞技术a23187剂量依赖性细胞内转运细胞外诱导作用铁离子检测存活率醋酸酯荧光素
摘要：目的研究细胞外铁离子(Fe3+)浓度变化对钙离子(Caco-2)细胞内Ca2+转运的影响及细胞内钙离子浓度升高与Caco-2细胞凋亡的关系.方法采用激光共聚焦扫描显微镜和流式细胞技术进行观察与检测.结果(1)利用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察发现,随着Caco-2细胞外Fe3+浓度的减少(DFO终浓度为100～300μmol/L),Ca2+向细胞内的转运量增加;而随着细胞外Fe3+浓度的增加(FAC终浓度为10～100μmol/L),Ca2+向细胞内的转运呈降低趋势;(2)经A23187和Fluo-3/AM处理后Caco-2细胞的存活率较高,达90%以上(用荧光素二醋酸酯检测);(3)A23187升高Caco-2细胞的胞内Ca2+浓度,呈剂量依赖性;经流式细胞技术(FCM)检测发现胞内Ca2+浓度增加具有诱导Caco-2细胞凋亡的作用.结论Caco-2细胞外Fe3+浓度的减少有促进Ca2+向细胞内转运的作用,但胞外Fe3+浓度增加时有抑制Ca2+向胞内转运的作用;胞内Ca2+浓度增加对Caco-2细胞凋亡具有诱导作用.
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