酸敏感离子通道1a介导细胞内钙离子内流调节椎间盘终板软骨细胞凋亡

作者：吕卫群 李霞 袁凤来椎间盘终板软骨细胞酸敏感离子通道1a钙离子凋亡

摘要：目的：观察酸敏感离子通道1a（ASIC1a）介导的钙离子内流在酸诱导的终板软骨细胞凋亡的作用。方法：SD培养大鼠终板软骨细胞，慢病毒为载体转染终板软骨细胞沉默ASIC1a，钙离子成像分析细胞内Ca2＋浓度（［Ca2＋］i）变化，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验分析酸诱导的细胞活力；ELISA测定凋亡率；荧光染料Hoechst 33342检测细胞凋亡。免疫印迹检测活化型半胱天冬酶-9（cleaved caspase-9）、活化型半胱天冬酶-3（cleaved caspase-3）等凋亡相关蛋白的表达。结果：阻断ASIC1a可以抑制酸诱导的［Ca2＋］i升高；用ASIC1asiRNA或PcTX1特异性阻断ASIC1a，明显抑制酸诱导的终板软骨细胞凋亡；胞外钙离子浓度降低抑制酸诱导的终板软骨细胞凋亡，与阻断ASIC1a结果一致，提示ASIC1a介导的钙离子内流在酸诱导凋亡中的作用。阻断ASIC1a，抑制酸诱导的cleaved caspase-9、cleaved caspase-3蛋白的表达。结论：酸激活的ASIC1a可能通过钙超载促使大鼠椎间盘终板软骨细胞凋亡。

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