作者:陈雪梅; 刘晓东; 任秀花; 臧卫东基因疫苗基因枪生育小鼠
摘要:目的:观察pcDNA3.1(+)-hPH-20基因疫苗经基因枪介导肌肉接种后在小鼠体内的表达及对小鼠受孕率的影响。方法:以小鼠为实验材料,将实验组经后腿股内侧肌以基因枪多点注射重组质粒pcDNA3.1(+)-hPH-20.5μg,空载体对照组注射pcDNA3.1(+)5μg,空白对照组注射生理盐水200μl,于接种后取股内侧肌检测hPH-20mRNA和蛋白的表达。采集抗血清做人精子穿去透明带仓鼠卵细胞实验,动物合笼观察受孕情况,持续4个月后进行基因疫苗的安全性检测。结果:注射部位肌肉检测到目的条带;原位杂交存肌细胞膜、胞质和部分肌细胞核可见到蓝紫色颗粒;免疫组织化学显色在肌细胞膜和胞质可见到棕褐色颗粒;实验组小鼠受孕率和对照组相比下降77.78%,同时用鼠抗hPH-20血清能明显降低精子穿卵率.夕h源性基因没有整合至宿主染色体。结论:hPH-20基因疫苗经基因枪介导肌肉接种有-定的免疫避孕效果。
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