作者：余资江; 应大君; 董世武; 张伟; 崔晓萍; ...腺病毒noggin基因同源重组
摘要：目的：构建小鼠noggin基因的重组腺病毒载体并鉴定。方法：采用基因工程技术，经过2次亚克隆将noggin基因片段克隆至穿梭质粒AdTrack-CMV上，利用pAdEasy-1系统进行细菌内同源重组后，脂质体转染293T细胞包装、扩增。采用PCR方法对重组体腺病毒进行鉴定，利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白GFP报告基因，对病毒滴度和感染效率进行监测。结果：酶切鉴定及PCR结果证明noggin基因重组腺病毒载体构建成功，病毒滴度达6．3×10^10pfu／ml。结论：应用细菌内同源重组法成功构建了含小鼠noggin基因的重组腺病毒载体。
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