作者：陈永珍; 朱旻; 张苏; 李芳生殖干细胞体外培养免疫细胞化学技术碱性磷酸酶活性培养的细胞成纤维细胞分离人胚胎干细胞细胞集落组织块培养细胞染色体培养条件细胞因子细胞生长组织化学胚胎组织初步鉴定生殖腺二倍体强阳性饲养层
摘要：目的:体外培养人胚胎生殖干细胞(EG),在不添加细胞因子的培养条件下,观察细胞生长情况.方法:取5～10周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜,进行组织块培养,采用组织化学及免疫细胞化学技术对培养的细胞进行鉴定.结果:培养4d后,在成纤维细胞的上面出现EG细胞集落;培养2周后,显示细胞呈圆形,胞质染成深蓝色;细胞染色体均为正常的二倍体核型;碱性磷酸酶活性强阳性;并检测到SSEA-1.结论:体外培养人胚胎生殖腺嵴,利用源于自身胚胎组织的成纤维细胞作为饲养层,可观察到EG细胞集落的形成;培养的细胞初步鉴定为人胚胎干细胞.
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