作者：安丽荣; 金连弘; 赵育桢; 傅松滨pc12细胞western印迹法效果检测基因转染app基因蛋白表达水平pcdna3倍增时间生物学性状对数生长期脂质体转染正常对照组基因蛋白质形态学方法mtt测定受体细胞阳性细胞稳定表达表达情况mtt法细胞形态
摘要：目的研究转染人app基因后PC12细胞的生物学性状变化和检测app基因在受体细胞中的蛋白表达水平.方法用脂质体转染对数生长期的PC12细胞,细胞分为3组:转染PCDNA3的正常对照组,app转染组和变异的V642-Iapp转染组.用G418筛选阳性细胞,建立稳定表达的细胞株.采用Western印迹法检测目的基因蛋白质的表达情况.使用细胞形态学方法、MTT法观察转染后对生长的影响.结果West-ern印迹法显示,转染app和V642-Iapp组有人的APP蛋白表达.细胞形态无明显改变,MTT测定转染后细胞的倍增时间和生长时间没有因为目的基因的导入而改变.结论正常条件下培养,过度表达人的APP对细胞的形态、倍增时间和生长无明显影响.
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