N基因特异性SSR标记筛选及晒烟对烟草花叶病毒病抗性鉴定

作者：冯月; 陈爽; 朴世领; 金哲; 王家川; 李久...晒烟烟草花叶病毒分子标记pcr体系人工接种

摘要：为早期鉴定晒烟TMV抗性,寻找抗TMV优良品种,试验以＂吉烟九号＂DNA为模板,选用1对N基因特异性引物,采用25μL PCR反应体系,对影响N基因的SSR-PCR反应体系的主要因子进行单因素优化,用所优化的体系对7对N基因特异性引物和25个烟草品种进行SSR-PCR扩增,并结合25个烟草品种的人工接种抗性鉴定结果,验证体系的稳定性和可靠性。试验结果表明：烟草N基因SSR-PCR最适反应条件为25μL体系中含20 ng/μL模板DNA,0.20μmol/L引物,1.5 mmol/L Mg^2＋,0.20 mmol/Ld NTPs,1.0 U Taq酶。由分子标记鉴定和人工鉴定结果可知,凡能扩增出特异性条带的品种,其人工抗性鉴定为TMV免疫。由此可见,N基因分子标记抗性鉴定与人工接种鉴定结果吻合,说明SSR分子标记鉴定N基因控制的烟草TMV抗性方法科学可靠,可以作为早期鉴定TMV抗性的有效辅助手段。

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