作者:黄卓 王丕武 张卓 马建 代力强甜菜碱醛脱氢酶基因原核表达纯化耐盐性鉴定
摘要:摘要:为转BADH基因玉米品系Western杂交等蛋白水平检测做前期准备,对辽宁碱蓬中的甜菜碱脱氢酶基因(BADH)进行原核表达、纯化及功能性鉴定。通过构建含有BADH基因的原核表达载体转化至大肠杆菌BI~1中,诱导其进行原核表达,并对表达产物进行Ni—NTA柱亲和层析纯化分析。所构建pET28a-BADH原核表达载体经PCR和双酶切鉴定及测序分析与预期结果一致;SDS-PAGE结果显示表达产物约50.5kD,且为可溶性;生物功能性鉴定BADH蛋白的表达使受体细胞在高盐条件下的抗性有显著提高。
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