作者：朱晓磊 林方 康晓平 李裕昌 杨银辉 钱爱...森林脑炎病毒e基因克隆表达
摘要：从森林脑炎病毒森张株的细胞培养液中提取总RNA,通过RT-PCR扩增E蛋白基因DomainⅢ段,克隆入原核表达载体GSTpET-30a（＋）中,构建重组原核表达质粒,用IPTG诱导表达。表达产物经Ni2＋亲和层析柱纯化后,进行Western blot鉴定,并用针对不同病毒的兔免疫血清验证其检测特异性。重组原核表达质粒GSTpET-30a-ED3经酶切证明构建正确。表达的重组蛋白相对分子质量约为41 kD,主要以包涵体的形式表达,并可与TBE阳性兔免疫血清特异性反应。结果表明：成功克隆了森林脑炎病毒森张株E蛋白基因DomainⅢ段,并在大肠埃希菌BL21（DE3）中表达,获得的ED3蛋白质具有良好的特异性。
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