作者:王恒安; 秦磊; 庞志轩; 赵国屏吸水链霉菌四环素抗性阻遏蛋白蛋白表达
摘要:根据吸水链霉菌"应城变种10-22"的一个文库质粒pHZ1392的测序结果设计了1对引物,聚合酶链反应扩增编码TetR的663 bp基因,利用T载体和蓝白斑筛选构建了克隆质粒T-TetR,经序列测定确认扩增序列正确后克隆至pET24a,构建了表达质粒pET24a-TetR,再经序列测定确认未发生移码后转化表达宿主茵E.coli DL21(DE3),IPTG诱导后的SDS-PAGE分析显示蛋白表达获得成功,并进一步利用Ni-NTA树脂纯化了TetR蛋白.
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