miR-137过表达慢病毒的包装和鉴定

作者：律东; 梁春梅; 李明颖; 殷静雯; 罗旭东; ...慢病毒hek293t细胞绿色荧光蛋白

摘要：目的：构建miR-137过表达慢病毒载体并进一步包装慢病毒，探讨miR-137在HEK293T细胞中的感染效率和表达水平。方法；化学合成miR-137序列并克隆到慢病毒载体GV209，得到并鉴定含有目的片段的重组质粒，采用Lipofectamine2000共转miR-137重组质粒与慢病毒辅助包装质粒到HEK293T细胞中生产慢病毒。以感染复数（MOI）值为40感染HEK293T细胞48h后，荧光显微镜下观察细胞中绿色荧光蛋白（GFP）的表达，采用荧光定量PCR法检测HEK293T细胞中miR-137的表达水平。结果：测序结果，目的基因序列与GenBank公布的miR-137基因序列完全一致。在感染的HEK293T细胞中观察到GFP的表达。过表达慢病毒感染细胞中miR-137表达水平是对照细胞的12．74倍。结论：成功包装miR-137过表达慢病毒，并可高效感染HEK293T细胞。

注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社