小鼠LIF编码基因的克隆与真核表达载体pcDNA3．1-LIF的构建

作者：姜秋 艾永华 聂代邦 孙宏晨 欧阳红生白血病抑制因子聚合酶链反应基因克隆真核表达载体小鼠近交icr

摘要：目的：通过克隆小鼠LIF编码基因，构建pcDNA3．1-LIF真核表达载体，为下一步建立转基因动物模型奠定基础。方法：采用ICR雌性小鼠子宫组织，提取总RNA，运用RT—PCR技术，扩增出小鼠LIF基因全长编码序列，采用同源重组方法构建具有新霉素抗性的小鼠LIF真核表达载体pcDNA3．1-LIF。结果：通过PCR获得了约612bp大小的特异性cDN段。经核苷酸序列分析，扩增得到的片段与小鼠LIF cDNA序列同源性为100％。经PCR及酶切鉴定筛选阳性克隆菌，表明LIF编码序列正确连入pcDNA3．1载体中。结论：成功克隆了小鼠LIF编码基因，并构建了真核表达载体pcDNA3．1-LIF。

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