作者：田磊 潘静坤 施明 薛毅珑基因工程细胞人肿瘤坏死因子转染蛋白分泌
摘要：目的构建能够持续分泌人肿瘤坏死因子（h TNFα）的中国仓鼠卵巢细胞（CHO）基因工程细胞h TNFα/CHO细胞系,并且观察其分泌功能的变化。方法应用载体GV141构建携带h TNF基因表达的质粒;采用脂质体转染法,经G418筛选稳定转染细胞株;通过Real-Time PCR鉴定其基因表达,采用ELIAS法鉴定其蛋白分泌情况。结果经序列比对,证明GV141-h TNFα表达载体构建成功,Real-Time PCR证明转染细胞系包含h TNFα目的基因,ELIAS鉴定结果证明该细胞系可以在一定代数稳定持续内分泌h TNFα。结论构建的h TNFα/CHO细胞系可以在一定代数内稳定持续地分泌人肿瘤坏死因子。
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