人脐带间充质干细胞植入大鼠肝切模型中的分化研究

作者：夏明慧; 劳学军间充质干细胞慢病毒载体肝细胞cd90

摘要：目的：探讨携带增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein,EGFP）标记的人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSC）植入肝部分切除大鼠体内后,其在大鼠肝脏中的分化能力。方法：首先将人脐带间充质干细胞分离培养并且进行表面标志物检测,以携带EGFP标记的慢病毒载体（lentiviral vector,LV）转染HUC-MSC。将SD大鼠随机分成3组：空白组、模型组及实验组,3组均建立大鼠肝切模型,空白组不注入HUC-MSC,模型组注入未标记的HUC-MSC,实验组注入EGFP标记的HUC-MSC。3个月后分离大鼠肝脏细胞,继而进行相关指标检测。冰冻切片HE染色观察病理结构,流式细胞仪检测间充质干细胞的纯度及CD90在肝细胞中的表达量,荧光显微镜观察EGFP在肝组织的表达。结果：病理切片显示带有EGFP的人脐带间充质干细胞在组织上表达,其中一部分聚集于血管内,形成栓子,附在血管壁上;手术后各组大鼠的肝都有炎症反应,但组织结构良好,各组间未见明显的形态学差异。HUC-MSC高表达CD44、CD29、CD105和CD90,不表达CD34、CD45、CD106、CD31、CD40和HLA-DR。流式结果显示模型组EGFP的表达率为（0.27±0.21）%,实验组为（11.68±1.46）%,与模型组相比具有统计学意义（P〈0.01）。CD90的表达结果显示模型组CD90的表达量较高,为（0.843±0.146）%,实验组低表达CD90,阳性率为（0.026±0.017）%,与模型组相比具有统计学意义（P〈0.01）。结论：人间充质干细胞可以分化为肝细胞,LV介导EGFP标记的人间充质干细胞可以稳定分化为肝细胞并且被检测到,但是易于形成栓子,肝细胞低表达CD90,为以后干细胞的分化提供实验依据。

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