利用生物信息学数据及工具合成表达链霉亲和素基因

作者：谢月辉; 余睿; 班韶; 赵冲; 孟照辉生物信息学基因合成链霉亲和素链霉亲和素磁珠

摘要：目的：人工合成表达链霉亲和素基因,制备链霉亲和素磁珠复合物用于核酸分离。方法：利用NCB I、BCM等提供的生物信息及软件工具,将链霉亲和素蛋白的基因进行密码子优化,并分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链,采用化学和酶促合成相结合的方法合成编码链霉亲和素蛋白基因。将纯化的链霉亲和素通过偶联剂与带羧基的磁粒共价结合,用于快速纯化生物素化的DNA。结果：用化学与酶促相结合一步法合成链霉亲和素全基因序列,用较短寡聚核苷酸链及较低的引物浓度合成该基因突变率很低,链霉亲和素在大肠杆菌中得到高效表达。用硅酸包衣的磁性微球对磁场反应良好且无磁记忆性,用碳二亚胺可实现活性羧基磁性微球与链霉亲和素两者的交联,反应条件温和。结论：制备的链霉亲和素磁珠复合物可用于生物素化的PCR产物纯化。

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