作者：秦宜德; 丁益; 邹思湘; 张海方猪乳高分子量蛋白质纯化鉴定
摘要：对猪乳中一高分子量蛋白(HMWP)进行了分离纯化，并对其某些生化性质进行了鉴定。猪乳通过去脂得到脱脂乳，再去除酪蛋白得到乳清。对乳清进行硫酸铵分级盐析，猪乳中HMWP在40％饱和度硫酸铵盐析下有最大沉淀。收集40％饱和度硫酸铵盐析沉淀，经过溶解、透析得到HMWP的粗品。通过Mono Q离子交换柱，对其粗品进行两次层析提纯，得到了HMWP纯品，其纯度和得率分别为97．85％和12．31％。多种植物凝集素的Western blotting鉴定表明，HMWP是一个糖基种类较少的糖蛋白，含有Man和GlcNAc。SDS-PAGE和凝胶过滤分别测得HMWP的分子量为114．8kD和115．0kD。通过等电点测定，HMWP的pI为5．10。HMWP的氨基酸组分分析得知，其富含Asp、Glu、Gly和Cys，疏水性氨基酸较低，仅占15．59％摩尔分数。这些结果说明HMWP是一个易溶于水的、酸性的分泌性单体球蛋白。N端氨基酸序列测定结果为Ala-Leu-Val—Gln-Ser-Gty-Leu-Ash-Leu-Val，通过从网络Genbank检索没有发现其同源蛋白的序列，说明其可能是一个新蛋白。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
