作者:徐桐红; 于冬艳; 任玲肝肿瘤hepg2细胞hbx转染notch信号通路多药耐药相关蛋白质类
摘要:目的研究转染HBx对Notch信号通路的影响,分析其诱导肝癌多药耐药(MDR)的发生机制。方法选用人肝癌HepG2细胞株进行转染,根据HBx转染情况将细胞分为转染HBx细胞组(HepG2-HBx组)、转染空载体细胞组(HepG2-con组)和空白细胞组(HepG2组)。实时定量聚合酶链反应(PCR)检测3组细胞HBx mRNA表达。蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测3组细胞HBx、Notch-1和多药耐药蛋白(MRP)表达,CCK-8法检测3组细胞增殖活性和耐药性。结果HepG2-HBx组有HBx片段和HBx蛋白表达,HepG2-con组和HepG2组未见HBx mRNA和蛋白表达。与HepG2组和HepG2-con组比较,HepG2-HBx组细胞增殖加快,Notch-1和MRP蛋白表达增加(P<0.05)。细胞周期检测结果显示,与HepG2组和HepG2-con组比较,HepG2-HBx组G0/G1期细胞显著减少,S期细胞增加(P<0.05,P<0.01)。MDR实验显示,HepG2-HBx组对5种药物的耐药指数增加明显(P<0.05)。结论转染HBx的肝癌HepG2细胞株可能通过诱导Notch-1与MRP的过表达,最终导致肝癌HepG2细胞增殖力增强和MDR的发生。
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