作者：刘英华; 张荣欣; 郑子新; 欧阳红; 张永醛还原酶芦丁槲皮素
摘要：目的：建立醛糖还原酶抑制剂筛选模型，提供筛选醛糖还原酶抑制剂的方法。方法：从大鼠晶状体中提取醛糖还原酶，设定10mmol／LDL-甘油醛为底物，0．15mmol／LNADPH为辅酶等条件建立初始酶促反应体系，维持其它条件不变改变底物浓度、辅酶浓度、反应温度和反应时间，选择酶活性峰值点建立模型，通过比较槲皮素与芦丁对醛糖还原酶的抑制作用检验此模型。结果：醛糖还原酶酶促反应体系组成：总体积1ml，各反应液的终浓度分别为：DL-甘油醛10mmol／L，NADPH0．15mmol／L，缓冲液PBS的pH=6．2，120mmol／L，醛糖还原酶提取物100山，反应温度37℃，反应时间3min。IR50槲皮素〈IR50芦丁，槲皮素对大鼠晶状体醛糖还原酶的抑制作用强于芦丁。结论：建立的醛糖还原酶抑制剂模型合理，易于操作，为筛选醛糖还原酶抑制剂提供了方法学基础。
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