作者：刘晶晶; 王荣; 王昌; 谢华; 罗冰峰; 张娟...高原低氧cyp2e1酶活性蛋白表达
摘要：目的探讨模拟高原低氧对大鼠肝脏中CYP2E1活性和蛋白表达的影响。方法将12只健康雄性Wistar大鼠随机分成对照组（1500m）和低氧组（4100 m）。低氧组置于高原模拟氧舱,3d后解剖,取大鼠肝脏、提取肝微粒体,用于CPY2E1的分析。采用Thermo AcclaimTM120C18柱（3 mm×150 mm,3μm）,流动相：甲醇-水（V∶V）60∶40,流速：1.0ml·min-1,柱温：25℃,检测波长：280nm,进样体积：20μl,建立测定氯唑沙宗浓度的HPLC方法,Western blot方法检测大鼠肝脏中CYP2E1的蛋白表达。结果活性测定结果显示,对照组氯唑沙宗在孵育体系中的平均反应速度为0.1384±0.0148μg·min-1,其酶动力学参数：最大反应速度（Vmax）为2.06μg·min-1,米氏常数（Km）为116.38±3.46μg·ml-1。低氧组氯唑沙宗平均反应速度为0.0822±0.0071μg·min-1,Vmax为2.60μg·min-1,Km为142.88±5.66μg·ml-1。Western blot结果显示,对照组CYP2E1的蛋白表达量是低氧组的9.88倍。结论与对照相比,低氧组大鼠的CYP2E1活性降低,蛋白表达量降低。
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