作者：刘姗; 刘艳霞; 闫承慧; 田孝祥; 刘丹; 刘...乳鼠肺微血管内皮细胞原代培养
摘要：目的建立一种简便、高效的原代乳鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）培养新方法。方法选取小于1周龄的C57BL/6乳鼠,采用琼脂糖微球抗体筛选法分离、培养原代PMVECs。倒置显微镜观察细胞形态,采用CD31、血管性血友病因子（vWF）相关抗原免疫荧光染色以及基质胶体外成血管实验鉴定内皮细胞,采用CCK-8法绘制细胞生长曲线。结果倒置显微镜下观察培养的原代PMVECs呈短梭形、类圆形,单层融合呈铺路石样排列。CD31相关抗原、vWF免疫荧光染色阳性,阳性率分别为91.35%±3.06%、92.99%±2.67%,证实培养的细胞为PMVECs。PMVECs接种在基质胶上8h后,有血管腔结构形成。CCK-8法绘制的生长曲线显示,琼脂糖微球抗体筛选法提取PMVECs培养2～5d后细胞处于对数生长期。结论琼脂糖微球抗体筛选法分离、培养乳鼠原代PMVECs简便、高效,是一种值得推广的分离培养乳鼠PMVECs的新方法。
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