作者：王丽雪; 祝筱梅; 董宁; 任超; 卢中秋; 姚...sestrin2高迁移率组蛋白b1细胞凋亡树突细胞
摘要：目的 探讨Sestrin2（SESN2）在高迁移率族蛋白B1（HMGB1）诱导树突细胞（DC）凋亡中的作用。方法 将培养的小鼠树突细胞DC2.4分为正常对照组及HMGB1 8、24、48h组（n=4）,HMGB1各亚组加入10ng/ml HMGB1培养相应时间;另将DC2.4细胞分为正常对照组及HMGB1组,HMGB1组设1、10、100ng/ml亚组（n=4）,予以不同浓度HMGB1刺激48h。采用Western blotting检测各组细胞SESN2、cleaved-caspase-3、Bcl-2蛋白的表达水平,共聚焦激光显微镜检测SESN2在细胞中的定位及表达,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。将载有过表达空载体NC、沉默空载体NS、过表达病毒载体SESN2 LV-RNA及沉默病毒载体SESN2 si RNA转入DC2.4细胞中（n=4）,以100ng/ml HMGB1刺激48h,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,并检测凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3、Bcl-2的表达水平。结果 与正常对照组比较,10ng/ml HMGB1刺激24、48h后,以及1、10、100ng/ml HMGB1刺激48h后,DC2.4细胞中SESN2的表达水平均显著上调,差异有统计学意义（P0.05）。在不同转染组中,100ng/ml HMGB1刺激48h后,SESN2 si RNA组DC2.4细胞凋亡率（65.96%±2.50%）明显高于空载体组（50.01%±2.07%）,同时凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3表达明显升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显下降,差异均有统计学意义（P〈0.05）;而SESN2 LV-RNA组细胞凋亡率（35.57%±1.69%）明显低于空载体组（49.04%±4.87%）,cleaved-caspase-3表达明显下降,Bcl-2表达明显升高（P〈0.05）。结论 SESN2在HMGB1诱导DC2.4细胞的凋亡过程中具有一定保护作用。
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