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骨髓间充质干细胞对磷酰胺氮芥诱导卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用

作者:付霞霏 何援利间质干细胞粒层细胞药物疗法细胞凋亡

摘要:目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对磷酰胺氮芥诱导卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用及可能机制。方法分离培养雌性Wistar大鼠卵巢颗粒细胞,加入磷酰胺氮芥(30μmol/L)至培养的颗粒细胞中,再与MSCs以不同比例共培养72h。实验分为4组:①颗粒细胞单独培养组(对照组);②共培养组1,MSCs∶颗粒细胞=1∶1;③共培养组2,MSCs∶颗粒细胞=1∶5;④共培养组3,MSCs∶颗粒细胞=1∶10。采用AnnexinⅤ检测凋亡率;采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化,ELISA法检测MSCs培养基中血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的浓度。结果对照组化疗药物引起的卵巢颗粒细胞凋亡率为35.04%±5.75%,而共培养组1、2、3的凋亡率分别为12.80%±2.42%,13.94%±3.86%,22.31%±5.67%,与对照组比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。蛋白质免疫印迹显示与MSCs共培养后,颗粒细胞Bcl-2表达水平明显增高(P〈0.05),Bax表达水平无明显变化(P〉0.05)。MSCs能分泌VEGF、HGF和IGF-1。结论MSCs对体外化疗药物诱导的卵巢颗粒细胞的凋亡有保护作用,其作用机制可能是其分泌的细胞因子通过旁分泌途径发挥作用,以及Bcl-2在颗粒细胞中表达上调有关。

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