作者：帖君; 房殿春; 宁晓燕人端粒保护蛋白rna干扰胃癌细胞
摘要：目的构建人端粒保护蛋白(hPOT1)基因的短链干扰核糖核酸(siRNA)表达载体,观察其在胃癌细胞中抑制hPOT1基因表达的作用,为进一步研究hPOT1在胃癌细胞生长增殖中的作用打下基础.方法设计并化学合成64nt编码hPOT1 siRNA基因片段的寡核苷酸,退火成双链后将其连接到pSUPER质粒的H1 RNA启动子下游,构建psiRNA-hPOT1重组质粒.经酶切、测序鉴定后,用脂质体介导的基因转染方法,转入SGC-7901胃癌细胞,用半定量RT-PCR检测hPOT1表达水平的变化.结果测序结果表明重组质粒psiRNA-hPOT1 64个碱基成功插入到预定位置,并且序列完全一致.hPOT1 siRNA表达载体psiRNA-hPOT1转入胃癌细胞后,可明显抑制SGC-7901细胞hPOT1的表达.结论构建的hPOT1基因的siRNA表达载体psiRNA-hPOT1重组质粒能显著抑制hPOT1基因在SGC-7901胃癌细胞中的表达.
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