作者：庄翔; 张潞渝; 吕梦欣; 陈俊霞ri蛋白ilk蛋白相互作用血管生成
摘要：目的研究核糖核酸酶抑制因子（RI）与整合素连接激酶（ILK）的相互作用以及对体外血管生成的影响。方法用LV5-RNH!homo、LV5NC、pCMV-3Xflag-ILK和pCMV-3×flag分别转染EJ细胞后，筛选稳定转染细胞系，分为EJ-RI、EJ-LV5、EJ-ILK、EJ-FLAG和EJ组；构建ILK与红色荧光蛋白融合表达载体YFP-ILK，与CFP-RI质粒共转染293细胞和EJ细胞，用荧光显微镜观察Rl和ILK蛋白在细胞内的共定位；构建真核表达质粒pCMV-3×flag-ILK，用GST蛋白沉降技术检测RI和ILK蛋白在体外的结合作用；用免疫共沉淀（co-IP）实验检测蛋向RI和ILK在真核细胞内的结合作用；用小管形成实验探索RI和ILK的相互作用对体外血管形成的影响。结果真核表达载体YFP-ILK和pCMV-3×flag-ILK构建成功；细胞内绿色荧光蛋白融合表达的RI和红色荧光蛋白融合表达的ILK在荧光显微镜下存在共定位现象；RI和ILK蛋白在原核细胞反应体系中存在相互作用；RI和ILK蛋白在真核细胞反应体系内也存在相互作用；RI和ILK的相互作用能抑制血管生成（P〈0．05）。结论RI和ILK蛋白在原核细胞防御体系和真核细胞反应体系中均存在相互结合作用，并对体外血管生成有抑制作用。
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