作者：张洁; 邱劲; 娄晋宁; 王小明; 斯琴; 吴其...脑血管内皮细胞小鼠实时荧光定量pcr技术tnfr1基因表达水平westeminos基因mrnainos表达野生型基因敲除体外培养blot蛋白表达受体介导表达量24h种细胞增高细胞内
摘要：目的探讨TNF-αⅠ型受体(TNFR1)对小鼠脑血管内皮细胞iNOS、HO-1基因表达水平的影响.方法体外培养TNFR1基因敲除的小鼠脑血管内皮细胞(BVEC/TNFR1)和野生型小鼠脑血管内皮细胞(BVEC),分别给予5 ng/mLTNF-α刺激24 h后,用实时荧光定量PCR技术及Western blot方法检测两种细胞iNOS基因和HO-1mRNA和蛋白表达量.结果给予TNF-α刺激后,iNOS mRNA和蛋白表达仅在野生型脑血管内皮细胞内明显增高,而在受体敲除脑血管内皮细胞无明显变化.HO-1mRNA和蛋白表达量在野生型小鼠脑血管内皮细胞和受体敲除小鼠脑血管内皮细胞均明显增高.结论TNF-α可能作用于脑血管内皮细胞TNFR1,增加iNOS表达,HO-1表达增高并非由TNFR1介导,而由TNF-α的其他受体介导.
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