作者：杨继红; 郑法雷; 吴华; 苏震; 段琳; 李艳体外培养细胞表型转化肾小管上皮细胞酶联免疫吸附法细胞培养上清液协同作用钙黏蛋白波形蛋白纤连蛋白阳性对照组流式细胞仪hkc细胞时间依赖性双染色法
摘要：目的探讨胰岛素样生长因子-I(IGF-I)对体外培养的肾小管上皮细胞(HKC)表型转化的作用及IGF-I和TGF-β1之间有无协同作用。方法分为4组：(1)无血清对照组；(2)阳性对照组TGF-β1(8μg/L)；(3)IGF-I(1、10、50和250μg/L)组；(4)IGF-I(50μg/L)+TGF-β1(8μg/L)和IGF-I(250μg/L)+TGF-β1(8μg/L)联合作用组。采用免疫荧光和免疫组化双染色法、流式细胞仪和酶联免疫吸附法观察HKC胞质中抗原角蛋白、钙黏蛋白、波形蛋白和α-SMA的表达，检测细胞培养上清液纤连蛋白和型胶原的浓度。结果IGF-I(50、250μg/L)能诱导HKC细胞表达波形蛋白、α-SMA，失去角蛋白和钙黏蛋白的表达；使α-SMA阳性的HKC细胞数显著高于阴性对照组。联合作用组α-SMA阳性的细胞数明显高于IGF-1或TGF-β1单用组，但无协同作用；IGF-I(10、50、250μg/L)组培养上清液纤连蛋白、I型胶原的浓度明显升高，有剂量和时间依赖性。结论IGF-I能诱导肾小管上皮细胞发生表型转化；IGF-I和TGFβ1对诱导HKC转化无协同作用。
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