作者：黄迪南; 姜英华; 侯敢hela细胞基因过表达hoechst33342电泳迁移率改变分析真核表达重组质粒细胞凋亡荧光染色检测细胞周期调控t1基因脂质体介导emsa法流式细胞术蛋白质分析瞬时转染外源基因mrna真核细胞密切关系hpo
摘要：目的观察人POT1(protection of telomeres 1)基因过表达对HeLa细胞细胞周期和细胞凋亡的影响.方法利用本课题组构建的hPOT1基因真核表达重组质粒pcDNA3-hPOT1,经脂质体介导瞬时转染HeLa细胞;通过RT-PCR和EMSA法(电泳迁移率改变分析)检测外源基因的表达效果,流式细胞术分析细胞周期,Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡.结果 pcDNA3-hPOT1重组质粒转染HeLa细胞48 h后,mRNA和蛋白质分析表明,外源性hPOT1基因能在HeLa细胞中有效表达,HeLa细胞阻滞于细胞周期S期,而对凋亡无明显影响.结论 hPOT1基因可能参与了高等真核细胞细胞周期调控过程,但与细胞凋亡无密切关系.
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