作者:俞红; 秦爱兰; 周霞秋; 张韦华卵圆细胞肝前体细胞干细胞免疫组化
摘要:本文拟建立大鼠卵圆细胞增殖模型,分离纯化卵圆细胞并对其特性进行研究.给SD大鼠喂饲2-乙酰氨基芴(2-AAF),剂量分别为5、10、15、20mg/kg,连续给药6d,第7天行三分之二肝切除术,术后继续给药1周,并于术后每隔3d取肝组织行常规组织学观察、细胞增殖试验及免疫组化染色.经免疫磁珠标记C-kit阳性细胞以纯化卵圆细胞,再经免疫细胞化学及RT-PCR对其进行鉴定.结果显示,10、15、20mg/kg三种剂量2-AAF均可成功建立卵圆细胞增殖模型,卵圆细胞增殖于第8天较明显,至第11天达高峰,第14天有所减少.卵圆细胞胞核BrdU染色阳性,卵圆细胞表达特异性抗原OV6、肝细胞标记白蛋白、胆管细胞标记CK19、甲胎蛋白以及连接蛋白43,同时还表达造血干细胞标记C-kit.实验表明,2-AAF剂量为10~20mg/kg时可获得较理想的大鼠卵圆细胞增殖模型,增生的卵圆细胞为具有双向分化潜能的肝干细胞/前体细胞.
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