作者：马力; 杨丽梅; 王艳; 郭时金; 沈志强; 张...兔出血症病毒vp60蛋白原核表达应用
摘要：为获得活性良好的兔出血症病毒基因工程抗原，本研究对兔出血症病毒ZB分离株的VP60基因进行了原核表达与初步应用。参照ZB株分离病毒VP60基因序列，设计合成一对特异性引物，PCR扩增长876bp的VP60基因片段。将目的片段定向克隆至pET30a表达载体中，经鉴定正确后，重组质粒转化BL21表达菌，经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组蛋白，重组蛋白纯化后，Western blot检测表明具有良好的抗原性与特异性，以该蛋白作为诊断抗原，初步建立了检测兔瘟病毒抗体的间接ELISA诊断方法。本研究为RHDv分子流行病学调查提供了参考，为VP60蛋白结构与功能研究、RHDV抗体检测试剂盒及新型疫苗的研制奠定基础。
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