作者:杨娜娜; 朱靖; 孟春花; 杜立新白血病抑制因子真核表达载体胚胎干细胞
摘要:运用RT-PCR技术,克隆含信号肽和不含信号肽的小鼠分泌型白血病抑制因子cDNA,通过pMD18-T simple载体和pBS-T载体过渡,分别构建了真核表达载体pSecTag-mlif(sp^+)和pSecTag-mlif(sp^-),酶切进行初步鉴定.利用Blast程序,搜索NCBI GeneBank中与构建表达载体中编码MLIF cDNA的同源序列,除在编码区216bp处碱基为G和在318bp处由G突变为T外,编码LIF基因的其余序列与已发表的完全一致.运用DNAMAN软件对翻译水平进行预测,结果发现这一突变位点并不影响蛋白的翻译.
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