作者：王媛; 李毅ns2克隆表达
摘要：本文对家蚕浓核病毒伊那株的非结构基因NS2进行了克隆和表达,以期进一步研究其功能。以伊那株的全基因组为模板,PCR扩增出NS2基因,将其克隆入表达载体pET-28a(+)中,转化到DH5a感受态细胞中培养筛选阳性克隆pET-28a-NS2,并抽提质粒进行验证。重组质粒经BamHI和HindIII双酶切和测序证实正确,然后转化到表达菌株大肠杆菌BL21(DE3)中。用IPTG诱导表达NS2融合蛋白,通过10%SDS-PAGE检测表明:经1mMIPTG诱导4h后,目的蛋白的表达量最大,得到的NS2融合蛋白约56.0KD,并经Western blot进一步验证正确。
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