海桐ISSR—PCR反应体系的建立与优化

作者：李建辉; 冯永辉; 姚永斌海桐issr反应体系优化

摘要：利用ISSR技术对海桐的遗传多样性进行研究，对影响PCR扩增效果的一些因素诸如退火温度、Mg^2＋浓度、4×dNTP浓度、牛血清白蛋白浓度、模板DNA用量、引物用量以及TaqDNA聚合酶用量等指标进行优化，建立了可用于海桐ISSR分析最适宜的反应体系：10μL PCR反应体积中，1×Taq酶配套缓冲液（10mmol／LTris·HCl，pH值9．0，50mmol／LKCl，0．1％Triton X-100），2．5mmol／LMgCl2，0．2mmol／L 4×dNTP，2．0mg／mL 牛血清白蛋白，10ng模板DNA，6pmol引物，0．3UTaqDNA聚合酶．引物UBC807的最适退火温度为50．7℃．

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