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首页 期刊 华中农业大学学报 一种用于高效筛选极端酶突变基因的质粒营救法【正文】

一种用于高效筛选极端酶突变基因的质粒营救法

作者:柯涛 胡凡 石晴芳 马向东定向进化筛选质粒营救极端酶

摘要:为简化定向进化筛选突变耐高温和耐酸碱酶等极端酶的繁复工作,建立了一种快速质粒营救法,可直接从加热处理的平板中回收携带有突变基因的质粒,用于进一步的随机突变基因的筛选和基因测序等。研究了在不同的热处理条件下的质粒营救效率,获得了质粒营救转化效率最高的处理条件。结果表明,本方法适于质粒大小在2-10kb范围的载体,可用于平板筛选最适酶活性温度在60-100℃、pH4-10的突变体酶,并可将一轮的筛选过程缩短1-2d。

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华中农业大学学报

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