作者：张红燕; 朱文旭; 赵诚; 张宏叶; 王涛; 陈...河川沙塘鳢dmrt1基因基因克隆表达分析
摘要：以河川沙塘鳢（Odontobutis potamophila）为研究对象，采用cDNA末端快速扩增（RACE）技术对DMRT1的全长基因进行了克隆，并利用生物信息学技术分析其结构和功能；采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测了河川沙塘鳢DMRT1基因在8种组织（鳃、肠、心、肌肉、脑、肝、脾、性腺）、胚胎发育的8个时期（受精卵期、桑椹胚期、原肠胚期、神经胚期、体节期、口裂期、出膜后1 d和出膜后3 d）以及性腺发育的4个时期（Ⅰ～Ⅳ期）中的表达变化。结果表明，河川沙塘鳢DMRT1基因cDNA序列的全长为2025 bp，编码297个氨基酸，其中包括894 bp的开放阅读框（ORF），73 bp的5′非编码区和1058 bp的3′非编码区。与已知物种的氨基酸序列比对后发现，河川沙塘鳢DMRT1的氨基酸序列与军曹鱼（Rachycentron canadum）、欧洲鲈鱼（Dicentrarchus labrax）的同源性最高。DMRT1基因在河川沙塘鳢的精巢组织大量表达，而在卵巢、肌肉、心以及肝4种组织中表达较少，在其它组织中几乎不表达；DMRT1基因在胚胎发育的各个时期都有表达，在原肠期的表达量最高；此外，DMRT1基因表达量在精巢发育的不同时期呈先下降后上升的趋势，在精子成熟期（Ⅳ期）达到最大值，而在卵巢发育的不同时期表达量较少且表达强度差异不明显，因而推测河川沙塘鳢DMRT1基因与精巢的发生和功能的维持有关。研究结果为解析河川沙塘鳢DMRT1基因的功能及其性别决定机制提供了基础资料，也为开展河川沙塘鳢单性育种奠定了基础。
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