作者：贾娴 房文红 胡晓 汪开毓异育银鲫肝微粒体酶促反应动力学
摘要：建立了异育银鲫肝微粒体体外孵育恩诺沙星（enrofloxacin,EF）的酶促反应体系,应用RP-HPLC法检测其主要代谢产物环丙沙星（ciprofloxacin,CF）,以间接反映恩诺沙星N-脱乙基酶的活性。采用二氯甲烷提取、正已烷去脂提取有效成分,样品回收率均大于81.4%,含CF或EF的肝微粒体样品能在4℃下稳定至少72 h,日内变异系数不超过3.51%,日间变异系数不超过3.71%,EF和CF准确度分别小于8.1%、6.5%,检测限（信超比为3）分别为0.15μmol/L、0.3μmol/L。恩诺沙星在银鲫肝微粒体中代谢符合一级消除方程C=140e-0.072t,消除速率常数（K）为0.072/h,消除半衰期（T1/2）为9.627 h。用Origin Lab软件的Hyperbl模型进行拟和,以方程y=P1.x/（P2＋x）表示米氏常数Vmax、Km两者的关系,求得Vmax为0.2602±0.0147nmol/mg.min,Km为53.8985±10.2257μmol/L,内在清除率（Clint）约为0.0048 mL/（min.mg）。恩诺沙星消除率和环丙沙星转化率的研究结果提示,恩诺沙星在银鲫肝微粒体中的代谢以N-脱乙基反应为主,提示可能还通过其它途径生成另外代谢产物。而酶动力学研究数据（Vmax,Clint值）表明,恩诺沙星N-脱乙基酶与底物结合力不强,酶促反应强度处于中等水平。据此,笔者推测恩诺沙星在银鲫肝微粒体中的代谢速度较为缓慢。
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