作者：谢建军; 王印庚; 张正; 荣小军腐皮综合征假交替elisa快速检测
摘要：以养殖刺参（Apostichopus jnponicus）腐皮综合征两种主要致病原灿烂弧菌（Vibrio splendidus）和假交替单胞菌（Pseudoalteromonas nigrifaciens）为抗原，分别制备兔抗血清，建立了两种病原菌的点酶ELISA（Dot-ELISA）检测方法。根据方正试验，确定检测用一抗、二抗最佳工作稀释度：灿烂弧菌抗血清稀释度320，酶标二抗稀释度3000；假交替单胞菌抗血清稀释度160，酶标二抗稀释度2000。阻断试验结果表明两种抗血清特异性均较高。灿烂弧菌抗血清在稀释度为40时与溶藻胶弧菌、河流弧菌、创伤弧菌等弧菌发生微弱交又反应，提高稀释度到160时，不发生交叉反应。假交替单胞菌抗血清基本不与常见海水致病弧菌发生交叉反应。人工感染试验检测结果表明该方法能从患病海参溃烂组织、未发病海参组织和感染水体检测到相应致病菌，检测灵敏度为9．4×10^3个／mL。人工感染试验检测结果经直接凝集反应验证。该方法操作简便、灵敏度高，不需复杂仪器设备，适合在基层推广。
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