作者:侯艳华; 王淑军; 李富超; 秦松转化全霉素属间接合转移海洋链霉菌
摘要:研究了海洋链霉菌分离株M095的基因转移系统。利用属间接合转移将具有oriT的大肠杆菌.链霉菌穿梭质粒pIJ8600转入Escherichia coil ET12567(pUZ8002),获得供体菌。将供体菌与预萌发的菌株M095的孢子进行接合转移,将质粒pIJ8600转入菌株M095中,其转化率为1.99×10^-4个接合转化子/受体。Southern杂交证明质粒pIJ8600已经整合到菌株M095的染色体上。同时,将来自Spirulina maxima(Cyanophyta)的别藻蓝蛋白基(apc)克隆在质粒pIJ8600的XbaⅠ和BglⅡ位点,产生质粒pAPIJ。用接合转移法将质粒pAPIJ转入菌株M095。通过SDS-PAGE分析,得到2个大小为22ku和17ku的蛋白,分别相对应于别藻蓝蛋白的α和β亚基。这些结果进一步证明菌株M095的遗传转化体系已经成功建立起来,这将为其他海洋放线菌遗传转化工作的研究奠定基础。
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