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首页 期刊 海洋科学 坛紫菜微卫星DNA序列的筛选【正文】

坛紫菜微卫星DNA序列的筛选

作者:胡则辉; 周志刚; 严兴洪微卫星筛选序列

摘要:自坛紫菜(Porphyra haitunensis)丝状体中提取的DNA,经Sau3 AI限制性内切酶消化后,将300-900bp之间的DN段回收,并连接到经BamHI酶切并去磷酸化的pUC18载体上,最后转化至大肠杆菌JM109感受态细胞中,构建坛紫菜小片段DNA质粒文库。选用pUCl8质粒的通用引物进行PCR反应,对文库进一步筛选并检测插入片段的大小,在384个阳性克隆中,有278个含有大小合适的插入片段。经测序及序列分析,在103个克隆中获得172个微卫星序列,其中完美型107个,占62.2%,非完美型53个,占30.8%。(GC)n与(CG)n在坛紫菜DNA中非常丰富,分别占25%及17%,但重复频率相对较低。

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