作者：喻达辉; 贾晓平; 陈素文; 李夏; 朱嘉濠脉冲参数合浦珠母贝卵子转基因电穿孔法
摘要：运用电脉冲转基因仪对合浦珠母贝卵子进行电脉冲处理以优化电穿孔法转基因的电击参数.实验中调制百分比:100%;脉冲间隔:1.0s;电极距离:2mm;脉冲个数:5个,参数保持不变.用不同的电脉冲参数组合(脉冲电压100～400 V、脉冲持续时间0.5～3.0 ms、脉冲频率10～50 kHz,共28个组合)对卵子电击,然后加入精子进行授精,统计各组受精率和孵化率,以受精率和孵化率这到50%以上为衡量指标.结果表明,合浦珠母贝卵子对低脉冲频率和高电压非常敏感,当频率低于20kHz或脉冲电压高于400V时对卵子损伤较大.脉冲持续时间对其影响不大,适应范围较宽.优化的转基因电击脉冲参数组合为:脉冲电压1.0kV/cm,脉冲持续时间2.0ms,脉冲频率50kHz,或者脉冲电压1.5kV/cm,脉冲持续时间1.5ms,脉冲频率50kHz.
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