作者：林盛国; 侯林; 陈志娟; 徐明玉; 王璐国孤雌生殖卤虫mrna差异显示sybr硝酸银溴化乙锭
摘要：利用mRNA差异显示技术研究中国孤雌生殖卤虫胚胎发育的相关基因,并对中国孤雌生殖卤虫差异显示中SYBR GreenⅠ、硝酸银和溴化乙锭三种染色方法进行了比较.以三种单碱基锚定引物对发育0 h,4 h,8 h,12 h,16 h和10天的中国孤雌生殖卤虫的RNA进行逆转录和26种随机引物进行PCR反应,经非变性的6%聚丙稀酰胺凝胶电泳后,分别用SYBR GreenⅠ、硝酸银和溴化乙锭染色,最后进行差异条带的回收和再扩增.结果表明:(1)6种样本的DD-PCR产物显示长200-3.0k不等的扩增片段,条带清晰,并呈现出有无和强弱的变化(2)SYBR GreenⅠ和硝酸银染色的灵敏度比溴化乙锭染色的灵敏度高(3)经SYBR GreenⅠ和溴化乙锭染色的凝胶的回收和再扩增效率比硝酸银染色的高(4)水煮法和NAP-25过柱法对凝胶片段的回收效果几乎相当.利用mRNA差异显示技术研究中国孤雌生殖卤虫胚胎发育相关基因时,得到了较好的扩增片段;三种染色方法中SYBR GreenⅠ染色灵敏度较高,并且SYBR GreenⅠ染色有利于凝胶片段的回收和再扩增.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
