作者:周静清; 冯锋; 邓安平; 王玉珍镉离子单克隆抗体自来水湖水
摘要:制备镉离子单克隆抗体,建立快速检测水样中镉离子的间接竞争酶联免疫吸附分析方法(EnzymeLinked Immunosorbent Assay,ELISA)。选择双功能螯合剂1-(4-异硫氰苄基)乙烯基二胺-N,N,N’,N’-四乙酸(ITCBE),分别与载体蛋白(牛血清白蛋白,BSA;卵清蛋白,OVA)和镉离子连接,制备出免疫原(Cd-ITCBEBSA)和包被抗原(Cd-ITCBE-OVA),采用免疫原免疫BALB/C小鼠,利用细胞融合杂交瘤技术制备出针对镉离子的单克隆抗体;建立快速检测水样中镉离子的间接竞争ELISA方法。结果:方法的IC_(50)为13.67 ng·m L^(-1),检测限为0.48 ng·m L^(-1)。该抗体除与汞离子的螯合物的交叉反应率为79.29%之外,与Zn^(2+)、Cr^(3+)、Pb^(2+)、Cu^(2+)、Ni^(2+)、Al^(3+)、Co^(2+)、Fe^(3+)、Mg^(2+)、Ca^(2+)和Ba^(2+)均无交叉反应。超纯水、自来水和湖水样品中镉的加标回收率为87.78%~103.3%,相对标准差为1.60%~11.41%。建立的间接竞争酶联免疫吸附法灵敏、快速,可用于水样中镉离子的检测。
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