作者:郭俊峰; 张慧宇; 张纲; 安洋; 杨阳; 王飞...降钙素基因相关肽成骨细胞氧化损伤超氧化物歧化酶活性氧
摘要:目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对MC3T3-E1成骨细胞氧化损伤的保护作用及其潜在机制。方法 1)构建细胞氧化损伤模型,将实验分为4组,H2O2组使用含不同浓度(10-1、10-2、10-3、10-4、10-5 mol·L^-1)H2O2的培养液,CGRP+H2O2组使用含不同浓度(10-6、10-7、10-8、10-9、10-10 mol·L^-1)CGRP的培养液预处理后再加入含10-4 mol·L^-1 H2O2的培养液,对照组为常规培养液,空白组不接种细胞。培养12、24、36、48 h后,CCK-8法检测细胞增殖活性,筛选最佳建模浓度和CGRP对成骨细胞氧化损伤的最佳保护浓度。2)采用含10-4 mol·L^-1 H2O2(H2O2组)、10-8 mol·L^-1 CGRP(CGRP组)的培养液和10-8 mol·L^-1 CGRP+10-4 mol·L^-1 H2O2培养液(CGRP+H2O2组)、常规培养液(对照组)培养成骨细胞,测定超氧化物歧化酶(SOD)的活性、活性氧(ROS)的含量以及炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6的水平。结果 1)在10-4 mol·L^-1 H2O2时细胞增殖开始出现抑制(P〈0.01),并呈浓度和时间依赖性;10-8 mol·L^-1 CGRP预处理后细胞增殖活性最高,与只加入10-4 mol·L^-1 H2O2有统计学差异(P〈0.01)。2)与H2O2组相比,CGRP+H2O2组SOD活性升高(P〈0.01),TNF-α、IL^-1β、IL-6水平降低(P〈0.05),ROS含量降低(P〈0.01)。结论 H2O2会对MC3T3-E1成骨细胞造成氧化损伤,CGRP对MC3T3-E1成骨细胞氧化损伤具有保护作用。
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