作者：车春晓; 姜科宇; 马媛媛; 曾飒; 周建业; ...变异链球菌感受态刺激肽抗菌肽特异性靶向抗菌肽
摘要：目的研究针对变异链球菌（S.mutans）的人源特异性靶向抗菌肽C16LL-37的生物学特性。方法通过标准固相合成技术（Fmoc保护法）合成人源抗菌肽LL-37、S.mutans感受态刺激肽（CSP）C端16个氨基酸组成的多肽CSPC16及二者的重组多肽C16LL-37;以LL-37、CSPC16为对照组,采用平板菌落计数法检测C16LL-37对S.mutans、黏性放线菌、大肠埃希菌、嗜酸乳杆菌、金黄色葡萄球菌的抗菌活性及其对S.mutans的靶向性。通过扫描电子显微镜（SEM）观察,浓度为32μmol·L^（-1）的C16LL-37作用后S.mutans的细胞形态学变化;利用酶联免疫吸附法测定C16LL-37的红细胞溶血率以及不同条件对C16LL-37抗菌活性的影响。结果 1）C16LL-37对S.mutans的最小抗菌浓度为16μmol·L^（-1）,最小杀菌浓度为64μmol·L^（-1）。2）C16LL-37浓度为64μmol·L^（-1）时,作用30 min后S.mutans存活率为3.46%,作用60 min后细菌存活率降至0%,其他4种细菌在各时间的存活率均大于60%（P〈0.05）。3）SEM观察：经C16LL-37（32μmol·L^（-1））作用后,部分S.mutans细胞形态出现不规则改变,部分细胞的细胞膜粗糙、细胞质外溢或出现细胞裂解。4）C16LL-37浓度不超过64μmol·L^（-1）时,红细胞溶血率低于0.33%,与阴性对照组无明显差异（P〉0.05）。5）不同温度、p H值、盐浓度及低浓度胰蛋白酶处理后,C16LL-37的抗菌活性无明显变化（P〉0.05）。结论 C16LL-37对变异链球菌具有靶向特异性,并且具有较强的抗菌活性、较高的生物安全性及良好的稳定性。
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