作者：申道南 成伟 贾岳 赵蕾 吴亚菲牙龈卟啉单胞菌脂多糖谷氧还蛋白akt氧化应激
摘要：目的从基因和蛋白水平研究谷氧还蛋白（Grx）在牙龈卟啉单胞菌脂多糖（LPS）诱导脐静脉内皮细胞（EA-hy926细胞）时的表达变化及其对Akt通路的调控作用。方法采用牙龈卟啉单胞菌的LPS（1 000 ng·m L-1）对EA-hy926细胞进行不同时间段（4、12、18、24 h）的刺激诱导,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测细胞grx1基因的表达变化;然后加入Grx特异性抑制剂氯化亚硝脲（BCNU）,使用Western blot法检测对照组、LPS组（1 000 ng·m L（-1）LPS刺激12 h）和BCNU组（25μmol·m L-1BCNU预处理30 min＋1 000 ng·m L~（-1）LPS刺激12 h）的Grx、Akt、磷酸化Akt蛋白的表达情况。结果 LPS诱导下,EA-hy926细胞的grx1基因表达量在各个时间段均上调,12 h时grx1表达量最高。LPS诱导12 h时,LPS组的Grx蛋白表达量较对照组明显升高（P〈0.05）,而BCNU可有效抑制Grx蛋白的表达（P〈0.05）;Akt蛋白表达量在各组间无明显差异（P〉0.05）,而LPS组的磷酸化Akt活性升高,显著高于对照组和BCNU组（P〈0.05）,与Grx蛋白的表达趋势一致。结论 LPS可以从基因和蛋白水平诱导Grx的表达;Grx是Akt的潜在调节因子,可能对LPS刺激下Akt的调控具有重要意义。
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