作者：秦子顺 殷丽华 王开娟 刘琪 程文晓 高鹏 ...人牙周膜干细胞淫羊藿苷增殖分化纳米羟磷灰石
摘要：目的采用体外和体内方法研究淫羊藿苷（ICA）对人牙周膜干细胞（h PDLSCs）增殖及骨向分化的影响。方法采用体外酶消化组织块法培养h PDLSCs,有限稀释克隆法分离纯化,检测细胞表面标志物以进行鉴定。体外实验：h PDLSCs与1×10-7 mol·L-1 ICA共同培养,用四甲基偶氮唑盐法检测其增殖情况,经碱性磷酸酶（ALP）染色后采用酶联免疫仪检测其骨向分化情况,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测其成骨基因的表达情况,茜素红染色检测其骨量表达。体内实验：将h PDLSCs和纳米羟磷灰石（n HAC）复合物经1×10-7 mol·L-1 ICA共同诱导培养后,将其植入免疫缺陷小鼠,术后30 d采用组织切片法观察成骨状况。结果体外实验：1×10-7 mol·L-1 ICA作用于h PDLSCs后,与不含ICA的对照组相比,实验组从培养的第2天开始,h PDLSCs增殖明显;培养3、5、7 d,实验组ALP活性明显升高;培养7 d,成骨基因的相对表达量明显增高;培养14、21、28 d,实验组钙化结节的面积明显大于对照组。体内实验：实验组骨量较对照组明显增加。结论 1×10-7 mol·L-1 ICA可以促进h PDLSCs的增殖及骨向分化,提示采用ICA代替常规生长因子应用于牙周组织工程具有一定可行性。
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