作者：常秀梅 刘宏伟 金岩 刘源 贺慧霞牙周膜干细胞分离鉴定
摘要：目的体外分离培养犬牙周膜干细胞，并对其进行生物学鉴定。方法采用有限稀释法进行犬牙周膜细胞克隆筛选，获得单细胞克隆来源细胞，检测其克隆形成率，并采用免疫组织化学染色、碱性磷酸酶染色、苏木精-伊红染色以及生长因子分化诱导等方法观察其生物学特性。结果1）克隆化分离培养的犬牙周膜干细胞呈集落状生长，增殖快，克隆形成率为0．95％。2）苏木精-伊红染色见细胞呈成纤维样，体积小、核大，有较多的双核细胞。3）碱性磷酸酶染色阳性。4）细胞表型组化鉴定波形丝蛋白、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原阳性，间充质干细胞表面标志STRO-1染色阳性，角蛋白染色阴性。5）在含β-磷酸甘油钠、维生素C、地塞米松的矿化液中，细胞被诱导分化为成骨细胞，碱性磷酸酶活性增强，Ⅲ型胶原染色阴性，能形成矿化结节，细胞表达成骨细胞特异的骨涎蛋白，在含β-羟基乙醇的培养液中，被诱导分化为神经细胞样细胞。结论克隆化分离培养的犬牙周膜干细胞具有很强的克隆形成能力，具有间充质干细胞表型和多向分化潜能。
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