作者：臧光祥; 穆亚冰; 孙宏晨; 刘金钟; 张泽兵...鳞状细胞癌腺病毒凋亡基因基因治疗
摘要：目的探讨以凋亡基因TRAIL为靶基因,腺病毒（Ad）为载体,巨细胞病毒启动子（CMV）为启动子的重组基因治疗药物AdCMV-TRAIL诱导鳞状细胞癌细胞系TCa83凋亡的作用。方法用重组绿色荧光蛋白基因（EGFP）的腺病毒AdCMV-EGFP为对照组,转染TCa83细胞确定重组腺病毒的转染率。在细胞转染1、3、5、7 d时,应用荧光倒置显微镜观察细胞形态,应用MTT检测细胞的存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率。以AdCMV-TRAIL为实验组转染TCa83细胞,采用RT-PCR方法检测细胞TRAIL的表达。结果AdCMV-EGFP在1 000 particles/cell时转染率为100%。细胞转染AdCMV-TRAIL和AdCMV-EGFP后,随时间延长细胞存活率逐渐下降,但AdCMV-TRAIL组较AdCMV-EGFP组下降更快（P〈0.001）。AdCMV-TRAIL和AdCMV-EGFP均能诱导TCa83细胞凋亡,而AdCMV-TRAIL组引起细胞凋亡的程度明显比AdCMV-EGFP组大（P〈0.000 1）。通过RT-PCR可检测到594 bp的TRAIL基因。结论AdCMV-TRAIL在体外能抑制TCa83细胞的活性,并能促进其凋亡。
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