作者：逄键梁; 吴补领; 张亚庆; 赵红萍; 刘艳丽牙本质基质蛋白1人牙髓干细胞成骨细胞
摘要：目的观察并比较不同长度的人牙本质基质蛋白1（Dmp1）基因上游启动子片段在人牙髓干细胞（HDPSC）、成骨细胞（OC）和子宫颈癌上皮细胞株Hela中的启动子活性，为进一步研究Dmpl基因在矿化组织中的特异性转录调控特点和作用机制奠定基础。方法以获得正确序列的2195bp Dmp1基因上游启动子重组T载体为模板，通过PCR方法获得不同长度的Dmp1基因上游启动子片段，将其构建至报告基因载体pGL3-Basic中，瞬时转染至HDP-SC、OC和Hela细胞，荧光素酶检测这些细胞中启动子活性并进行分析。结果成功地获得了6段不同长度的Dmp1启动子目的片段。酶切鉴定表明不同长度启动子报告基因载体构建成功，不同片段的Dmp1启动子在不同细胞中活性不同，在HDPSC和OC中活性较强，而在Hela细胞中活性最低。在-505--193bp区和-935--505b区可能分别存在HDPSC和OC较为特异的转录调控作用区域点，该区可能包含Dmp1表达的基础调控元件。结论成功克隆了不同长度的Dmp1上游启动子的序列，不同启动子片段在牙髓干细胞和成骨细胞等矿化性细胞中活性较强，并初步确定了Dmp1启动子在矿化性细胞中的基本启动子区域，而在非矿化性细胞Hela细胞中活性较低。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
