作者：潘朝斌; 黄洪章; 王建广; 侯劲松脂质体hes基因基因转染舌鳞癌tca8113细胞蛋白表达内皮抑素
摘要：目的建立转人内皮抑素(hES)基因舌鳞癌Tca8113细胞,检测体外培养的转基因细胞基因蛋白表达.方法为了建立携带hES基因的舌鳞癌Tca8113细胞克隆,选用阳离子脂质体Lipofectamin为载体,将含hES基因的质粒--p+{BLAST}-hES转染Tca8113细胞,以Blasticidin S抗生素筛选阳性克隆.免疫组织化学S-P方法检测体外培养的转基因Tca8113细胞克隆中ES的表达.结果经Blasticidin S抗生素筛选,转染hES基因的Tca8113细胞由于具有bsr抗性基因,可以在含有50 μg/ml Blasticidin S的培养基中生长和传代,从而得到携带hES基因的Tca8113细胞克隆.该细胞在体外培养传代96 h后,经免疫组织化学检测,hES表达的强阳性(+ + +)率为100%.结论以脂质体介导hES基因转染Tca8113细胞效率高,转基因细胞具有高效表达活性目的基因产物的能力.
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